Fluorcam fermé GFP / CHL. Système d'imagerie par fluorescence

FluorCamLe système fermé d'imagerie par fluorescence GFP / CHL. Peut servir une gamme d'études de biologie moléculaire et cellulaire appliquées aux protéines fluorescentes vertes. Une roue de filtrage entièrement commandée par logiciel et motorisée, ainsi qu'une série de bancs de filtres, sont installés sur le système d'imagerie de fluorescence fermé pour détecter et Imager les protéines fluorescentes GFP, EGFP, wtgfp, yfp, BFP ou d'autres bandes et fluorescéines.

Le système d'imagerie par fluorescence GFP / CHL. Fermé fluorcam peut également être utilisé pour détecter les changements dynamiques et la distribution spatiale de la fluorescence de la chlorophylle émise par les plantes, mesurer les processus à effet Kautsky, l'extinction par fluorescence et d'autres processus de fluorescence instantanée (transitoires) et fournir des images de fluorescence 2D. Une configuration matérielle spécialement conçue permet de convertir automatiquement ce système en protéines fluorescentes, en imagerie par fluorescéine ou en imagerie par détection de fluorescence de la chlorophylle. Le système est hautement intégré et l'adaptation à l'obscurité de l'échantillon peut être effectuée.

Domaines d'application:

· détection fluorescente des protéines fluorescentes et de la fluorescéine

· transfert de gènes et technologie des biocapteurs

· recherche sur les plantes génétiquement modifiées

· dépistage de la résistance aux différents génotypes

· Étude des interactions plantes - microorganismes

· Étude des interactions plantes - protozoaires

· caractérisation photosynthétique des plantes et dépistage des troubles métaboliques

· détection de stress biotique et abiotique

· Étude de la résistance au stress ou de la susceptibilité des plantes

· Études d'hétérogénéité STOMATIQUE

· recherche sur la confusion métabolique

· long potentiel et évaluation du rendement

Caractéristiques fonctionnelles:

· opération facile, hauteur d'échantillon de mesure réglable, boîte d'adaptation à l'obscurité spéciale intégrée, pratique pour le traitement de l'adaptation à l'obscurité des plantes testées, l'opération, etc.

· CCD haute résolution avec une résolution allant jusqu'à 1392 × 1040 pixels pour une capture rapide et précise de la fluorescence de la chlorophylle et de la GFP

· des mesures d'imagerie répétées automatiques peuvent être effectuées, un programme expérimental (Protocoles) peut être configuré pour des mesures d'imagerie cycliques automatiques, les données de mesure d'imagerie sont automatiquement déposées sur l'ordinateur par date temporelle (avec horodatage)

· diverses procédures expérimentales communes (Protocoles) avec effet d'induction Kautsky, analyse de trempe par fluorescence, etc., mesurant les paramètres d'analyse jusqu'à plus de 50

· en option avec module d'imagerie couleur tetracam, zone d'imagerie maximale de 20 × 25 cm pour l'analyse morphométrique des feuilles ou des plantes

échantillons typiques:

• Feuilles, tiges, graines, racines, plante entière

• CALS, plantules dans une boîte de pétri

• Fruits et fleurs

• Bactéries bleues, algues vertes, bactéries

• Animaux génétiquement modifiés

Paramètres techniques:

• Paramètres de mesure: Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm'，Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII,NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP，QY, QY_Ln,Rfd, ETR Attendez plus de 50 paramètres de fluorescence de la chlorophylle, chaque paramètre peut afficher une image couleur fluorescente à 2 dimensions

· un programme de mesure automatique complet (Protocole) pour modifier librement le programme de mesure automatique

A) FV / FM: les paramètres de mesure incluent fo, FM, FV, QY, etc.

B) effets induits par Kautsky: fo, FP, FV, FT - LSS, QY, RFD, etc. paramètres de fluorescence

C) Analyse de trempe par fluorescence: fo, FM, FP, FS, FV, QY, Φii, npq, QP, RFD, QL, etc. plus de 50 paramètres

D) Courbes de réponse lumineuse LC: fo, FM, QY, QY, LN, ETR, etc. paramètres de fluorescence

E) absorption par vs NDVI (en option)

F) cinétique de réoxydation a (en option)

G) Mesures d'imagerie par fluorescence statique telles que GFP

H) Analyse cinétique de fluorescence rapide ojip (en option): mo (pente initiale de la courbe ojip), surface fixe ojip, SM (mesure de l'énergie nécessaire pour fermer tous les centres de photoréaction), QY, Pi, etc. 26 paramètres

§ capteur CCD Tomi - 2 haute résolution

A) CCD à balayage progressif

B) Résolution d'image la plus élevée: 1360 × 1024 pixels

C) résolution temporelle: jusqu'à 20 images par seconde à la résolution d'image la plus élevée

D) Résolution de conversion A / D: 16 bits (échelle de gris 65536)

E) taille des pixels: 6,45 µm × 6,45 µm

F) mode de fonctionnement: 1) mode vidéo dynamique pour la mesure des paramètres de fluorescence de la chlorophylle; 2) mode instantané pour la mesure de protéines fluorescentes et de colorants fluorescents tels que GFP

G) mode de communication: Gigabit Ethernet

• Panneau de source lumineuse: 4 grandes plaques de source lumineuse à LED encapsulées à haute intensité, chaque plaque de source lumineuse est composée d'une matrice de LED 8 × 9, la zone effective de la plaque de source lumineuse est la même que la zone d'imagerie 13 × 13 cm

• Lumière de mesure: lumière rouge 617nm de série, autres bandes sélectionnables, durée réglable de 10µs à 100µs

• Lumière photochromatique bicolore: 2 Lumière Rouge (617nm) + 2 Lumière bleue (470nm), actinic1 intensité lumineuse maximale 300 µmol (photos) / m².s, actinic2 intensité lumineuse maximale 2000 µmol (photos) / m².s; La lumière photochimique maximale peut être mise à niveau à 3000 µmol (photos) / m².s

• Flash saturé: intensité lumineuse maximale de 4000 µmol (photos) / m².s, extensible à 6000 µmol (photos) / m².s

• Zone d'imagerie: 13 × 13 cm, analyse par imagerie des feuilles de plantes, des tissus végétaux, des algues, des mousses, des lichens, des plantes entières ou multiples, des plaques de 96 puits, des plaques de 384 puits, etc.

• Module de mesure GFP: roue de filtrage 7 bits et Filtre spécial pour mesurer la GFP (Protéine fluorescente verte)

• Module de mesure d'absorption par (en option): carte source lumineuse rouge lointain 740nm (FAR), 660nm LED bicolore et Filtre spécial pour mesurer l'absorption par et NDVI

• QA dans l'analyse d'imagerie cinétique d'oxydation (en option): mesure d'analyse cinétique de fluorescence STF disponible, intensité lumineuse stroboscopique à rotation unique (STF) jusqu'à 120 000 µmol (photos) / m².s en 100 µs

• Module de cinétique de fluorescence rapide ojip (en option): résolution temporelle jusqu'à 1 µs, peut déterminer l'analyse de la courbe ojip avec une vingtaine de paramètres pertinents, notamment: fo, FJ, FI, p ou FM, VJ, VI, mo, Area, Fix Area, SM, SS, N (nombre de tours de réduction QA), Phi­po, psi­o, phi­eo, phi­do, phi­pav, ABS / RC (flux de photons absorbants par unité de centre réactionnel), tro / RC (flux de photons initialement captés par unité de centre réactionnel), ETO / RC (flux de photons initialement transmis par électrons par unité de centre réactionnel), Dio / RC (Dissipation d'énergie par unité de centre réactionnel), ABS / cs (flux de photons absorbants par unité de Section d'échantillon), tro / CSO, RC / csx (densité du Centre réactionnel), piabs (Performance basée sur le flux de photons absorbants)indices ou indices dits de survie), pics (indice de « Performance » basé sur la section ou indice dit de survie)

• Plaque de source de lumière LED UV (en option): 365 nm ou 385 nm, 1) mesure de la fluorescence multicolore (voir le système d'imagerie de fluorescence multispectrale fluorcam pour plus de détails); 2) mesure de wtgfp (Protéine fluorescente verte sauvage), dapi (4 ', 6 - diamidino - 2 - phénylindole, un colorant Fluorescent)

• Panneau de source lumineuse LED bleue (en option): 470 nm, 1) mesure EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein); 2) pour l'étude de la fonction stomateuse

• Panneau de source lumineuse LED verte (en option): 530nm, mesure yfp (Protéine fluorescente jaune)

* La mesure des protéines fluorescentes telles que wtgfp, dapi, EGFP, yfp ou des colorants fluorescents nécessite également la sélection de filtres appropriés

• Caractéristiques du logiciel d'analyse d'imagerie par fluorescence fluorcam: avec Live (test en direct), Protocols (personnalisation de la sélection du programme expérimental), pre - Processing (prétraitement d'imagerie), Result (résultats d'analyse d'imagerie), etc.

• Protocole de programme expérimental personnalisé du client (Protocoles): peut définir le temps (par exemple, la durée de la lumière mesurée, la durée de la lumière photochimique, le temps de mesure, etc.), l'intensité lumineuse (par exemple, différentes intensités de lumière photochimique photochimique, l'intensité du flash saturé, la lumière de Mesure modulée, etc.), avec un langage de programme expérimental dédié et des scripts, les utilisateurs peuvent également créer librement de nouveaux programmes expérimentaux en utilisant le modèle de programme assistant dans le menu Protocole

• Fonction d'analyse de mesure automatique: peut définir un programme expérimental (Protocole) mesure d'imagerie cyclique automatique sans surveillance, nombre de répétitions et intervalle personnalisé par le client, les données de mesure d'imagerie sont automatiquement déposées sur l'ordinateur par date temporelle (avec horodatage)

  Mode Snapshot: grâce au mode d'imagerie instantanée, vous pouvez régler librement l'intensité lumineuse, le temps d'obturation et la sensibilité pour obtenir des images de fluorescence stable et instantanée d'échantillons de plantes clairement mises en évidence

• 

• Pré - traitement d'imagerie: le logiciel du programme reconnaît automatiquement plusieurs échantillons végétaux ou plusieurs zones, ou sélectionne manuellement les zones (région d'interest, roi). La forme de la circonscription manuelle peut être carrée, circulaire, polygonale arbitraire ou festonnée. Le logiciel automatise les mesures pour analyser la courbe cinétique de fluorescence et les paramètres correspondants de chaque échantillon et de la zone sélectionnée, le nombre d'échantillons ou de zones n'est pas limité (> 1000)

• Mode d'analyse des données: avec le mode « Calcul du signal et repoussage » (moyenne arithmétique) et le mode « Calcul de la moyenne du signal », sélectionnez le mode « Calcul du signal et repoussage » dans le cas d'un rapport signal sur bruit élevé et le mode « Calcul de la moyenne du signal et repoussage » dans le cas d'un rapport signal sur bruit faible pour filtrer les erreurs causées par le bruit

• Résultats de sortie: diagramme dynamique de fluorescence à haute résolution temporelle, vidéo de variation dynamique de fluorescence, fichier Excel de paramètres de fluorescence, histogramme, diagramme d'imagerie de différents paramètres, liste de paramètres de fluorescence pour différents roi, etc.

• Bande passante du détecteur CCD: 400 – 1000nm

· régime d'alimentation de la lumière: statique ou dynamique (sinus)

· réponse spectrale: Efficacité quantique maximale (70%) à 540 nm, réduction de rotation de 50% à 400 nm et 650 nm

· bruit de lecture: inférieur à 12erms, typique 10e

· capacité du puits complet: plus de 70 000 E (non connecté)

· BIOS: le firmware peut être mis à niveau

· méthode de communication: Gigabit Ethernet

· dimensions: 471 mm (w) × 473 mm (d) × 512 mm (h)

· poids: appr. 40 kg

· entrée d'alimentation: appr. 1100 W

· tension d'alimentation: 90 - 240 V

Applications typiques:

L'Institut des sciences de la vie de Shanghai a utilisé la mesure fluorcam pour obtenir un graphique d'imagerie GFP, dans lequel les plantes émettant des couleurs vives sont des plantes exprimant GFP, plus leur couleur est biaisée vers le rouge, plus cela indique qu'elles expriment GFP.

Rétrécissement et dilatation variables de la tordeuse des boutons (T1 = 0 point, T2 = 30 points, T3 = 60 points) Analyse par imagerie NDVI vs GFP (Miguel, 2014)

Origine: Europe